Въведение
Грам -отрицателни са бактериите, които след преминаване на техниката на оцветяване по Грам придобиват цвят, вариращ от розов до червен.
Бактериална клетъчна стена
Бактериалната клетъчна стена може да бъде определена като твърда структура, която обхваща бактериалната клетка, придавайки й определена здравина и обуславяща нейната форма.
Основният елемент, който съставлява бактериалната клетъчна стена, е пептидогликан (иначе известен като бактериален мукопептид или murein).
Пептидогликанът е полимер, състоящ се от дълги линейни полизахаридни вериги, свързани заедно чрез напречни връзки между аминокиселинните остатъци.
Полизахаридните вериги се състоят от повторение на дизахарид, който от своя страна се състои от два монозахарида: N-ацетилглюкозамин (или НАГ) и киселина N-ацетилмурамика (или NAM), свързани помежду си чрез β-1,6 гликозидни връзки.
След това дизахаридите са свързани помежду си с гликозидни връзки тип β-1,4.
Свързани с всяка молекула на NAM откриваме "опашка" от пет аминокиселини (a пентапептид) завършващ с две равни аминокиселини, по -точно с две молекули на D-аланин.
Именно тези крайни молекули на D -аланин - след действието на ензима транспептидаза - позволяват образуването на омрежни връзки между паралелните вериги на пептидогликана.
По -конкретно, транспептидазата води до пептидна връзка между третата аминокиселина от полизахаридна верига и четвъртата аминокиселина от паралелната полизахаридна верига.
Функции на клетъчната стена
Бактериалната клетъчна стена играе много важна защитна роля спрямо бактериалната клетка, но не само това, тя също е в състояние да регулира транспорта на вещества вътре в самата клетка.
Следователно може да се каже, че основните функции на клетъчната стена са:
- Предотвратяване на разграждането на бактериални клетки поради осмотично налягане. Всъщност, много често бактериите живеят в хипотонична среда, тоест в среда, където присъстват големи количества вода и които са „по -разредени“ от вътрешната среда на бактериалната клетка. Тази разлика в концентрацията причинява преминаването на водата от външна среда (по -малко концентрирана) във вътрешността на бактериалната клетка (по -концентрирана) в опит да се изравни концентрацията между двете среди. Неконтролираното навлизане на вода би накарало бактериалната клетка да набъбне, докато не се спука (осмотичен лизис).
Функцията на клетъчната стена е именно да устои на външното налягане на водата, като по този начин предотвратява подуването и лизиса на бактериите. - Защитете плазмената мембрана и клетъчната среда от молекули или вещества, вредни за самата бактерия.
- Регулира постъпването на хранителни вещества в бактериалната клетка.
Всичко, което е описано досега, е валидно както за клетъчната стена на грам-отрицателни, така и за клетъчната стена на грам-положителни.
Въпреки това, тъй като целта на тази статия е да предостави информация за характеристиките на грам-отрицателните бактерии, по-долу ще бъде описана само клетъчната стена на последната, а тази на грам-положителните бактерии няма да се разглежда.
Грам-отрицателна клетъчна стена
В грам-отрицателната стена пептидната връзка, която се образува между полизахаридните вериги на пептидогликана, е директна.
Клетъчната стена на грам-отрицателни е много тънка и има дебелина 10 nm, но е доста сложна, тъй като пептидогликанът е заобиколен от закотвена към него външна мембрана.
Външната мембрана се състои от вътрешен лист от фосфолипиден тип и външен лист, образуван от липополизахарид (или LPS).
Външната мембрана и пептидогликанът са свързани помежду си чрез липопротеини. Тъй като присъствието само на липопротеини върху външната мембрана би възпрепятствало преминаването на хидрофилни молекули, други специфични протеинови комплекси също присъстват в мембраната. свинско месо. Порините са канали, които позволяват преминаването на малки хидрофилни молекули.
За транспорта на по -големи молекули, от друга страна, присъстват други транспортни протеини, т.е. превозвачи.
Пространството между външната мембрана и пептидогликана се нарича периплазма и съдържа протеини и ензими с биологични функции.
Липополизахаридът се заменя с три отделни части:
- Вътрешна липидна част, наречена липид А който има ендотоксинови функции, следователно играе важна роля в патогенността на грам-отрицателни;
- Централна полизахаридна част, наречена ядро;
- Външна полизахаридна верига, наречена антиген О. Този полизахарид се състои от прости захари от различни видове, събрани в блокове от три или пет единици и повторени няколко пъти, за да образуват молекули с определени антигенни характеристики, характерни за всеки вид бактерии.
Петно по Грам
Оцветяването по Грам е процес, разработен и разработен през 1884 г. от датския бактериолог Ханс Кристиан Грам.
Първият етап от тази процедура включва приготвяне на намазка (т.е. тънък слой от материала, който ще се анализира), фиксиран чрез топлина. С други думи, проба от бактериите, които ще се анализират, се поставя върху предметно стъкло и - чрез използването на топлина - микроорганизмите се убиват и блокират върху самото стъкло (горещо фиксиране). След като подготвите намазката, можете да продължите с действителното оцветяване.
Техниката на оцветяване по Грам има четири основни стъпки.
Фаза 1
Топлинно фиксираната намазка трябва да бъде покрита с багрилото кристално виолетово (известен също като тинтява виолетова) за три минути. По този начин всички бактериални клетки ще станат лилави.
Фаза 2
В този момент, ла Решението на Лугол (воден разтвор на йод и калиев йодид, дефиниран като мазилка, тъй като е в състояние да фиксира цвета) и се оставя да действа за около минута.
Разтворът на Лугол е полярен и прониква в бактериалната клетка, където се среща с кристално виолетовото, с което образува хидрофобен комплекс.
Фаза 3
Плъзгачът се промива с белина (обикновено алкохол или ацетон) за около двадесет секунди. След това се измива с вода, за да се спре действието на избелващия агент.
В края на тази фаза клетките на грам-положителните бактерии ще запазят лилавия цвят.
Грам-отрицателните клетки, от друга страна, ще бъдат обезцветени. Това се случва, защото алкохолът атакува липополизахаридната структура на външната мембрана на тези бактерии, като по този начин улеснява загубата на погълнатото преди това багрило.
Фаза 4
Към слайда се добавя второ багрило (обикновено, киселинен фуксин или сафранин) и го оставете да действа за няколко минути.
В края на тази фаза обезцветените по-рано грам-отрицателни бактериални клетки ще придобият цвят, вариращ от розов до червен.
Видове грам-отрицателни бактерии
Подобно на грам-положителната група, грам-отрицателната група включва и множество бактериални видове.
По -долу накратко ще бъдат илюстрирани някои от основните бактерии, принадлежащи към тази група.
Ешерихия коли
L "E. coli това е бактерия, която обикновено присъства в човешката чревна бактериална флора, но при имуносупресирани субекти може да доведе до условно патогенни инфекции.
Наистина, E. coli той е отговорен за опортюнистични инфекции, които причиняват патологии като уретроцистит, простатит, неонатален менингит, ентерохеморагичен колит, водна диария или пътническа диария или сепсис.
В зависимост от вида на инфекцията E. coli тригери, могат да се използват различни видове антибиотици. Най -често използваните лекарства са карбапенеми, някои пеницилини, монобактами, аминогликозиди, цефалоспорини или макролиди (като кларитромицин или азитромицин).
Бактерии, принадлежащи към рода Salmonella
Тези бактерии са отговорни за стомашно -чревни инфекции, които могат да причинят заболявания като гастроентерит, тиф (ентерична треска) и диария.
Ципрофлоксацин, амоксицилин или цефтриаксон обикновено се използват за борба с инфекциите, причинени от тези бактерии.
Klebsiella pneumoniae
Там K. pneumoniae той е отговорен за инфекции на пикочно -половите пътища, които причиняват цистит, простатит или уретроцистит и инфекции на дихателните пътища, които причиняват белодробни абсцеси или пневмония.
За лечение на инфекции с K. pneumoniae се използват цефалоспорини, карбапенеми, флуорохинолони или някои видове пеницилини.
Бактерии, принадлежащи към рода Shigella
Тези микроорганизми са отговорни за появата на заболявания като бациларна дизентерия и остър гастроентерит.
За лечение на този вид инфекция обикновено се използват флуорохинолони.
Vibrions (или Vibrio)
Вибрионите са извити бацили, т.е. бактерии, характеризиращи се с форма на "запетая".
Сред патогенните вибрации за човека си спомняме:
- Вибрион холера, отговорен за появата на холера. Като цяло, инфекции от V. cholerae те се лекуват с тетрациклини или флуорохинолони.
- Vibrio parahaemolyticus, отговорен за гастроентерит, ентероколит, диария и дизентерично-подобен синдром.
В случай на инфекция с V. parahaemolyticus могат да се използват антибиотици като флуорохинолони или тетрациклини. В някои случаи антибиотичната терапия може да бъде избегната и да се пристъпи към симптоматично лечение.
Бактерии, принадлежащи към рода Yersinia
Бактериите от рода Yersinia са бацили, тоест те са бактерии, характеризиращи се с цилиндрична форма.
Сред патогенните йерсинии за човека си спомняме:
- Yersinia enterocolitica, отговорен за "появата на" стомашно -чревни инфекции, които причиняват заболявания като остър гастроентерит или мезентериален аденит. Y. enterocolitica те обикновено се лекуват с антибиотици като флуорохинолони, сулфонамиди или аминогликозиди.
- Yersinia pestis, отговорни за появата на бубонната чума. Инфекции, причинени от Y.пестис те могат да бъдат третирани с аминогликозиди, хлорамфеникол или флуорохинолони.
Campylobacter jejuni
The C. jejuni това е спирален бацил, отговорен за появата на остър ентерит и диария.
Инфекциите, причинени от него, могат да бъдат лекувани с макролиди (като например еритромицин) или с флуорохинолони.
Helicobacter pylori
H. pylori това е извит бацил, отговорен за появата на стомашно -чревни заболявания като хроничен активен гастрит и пептична язва.
Лечение за "изкореняване на"Helicobacter pylori предвижда използването на три различни вида лекарства:
- Колоиден бисмут, цитопротектор, използван за предотвратяване на адхезията на Helicobacter pylori към стомашната лигавица;
- Омепразол или друг инхибитор на протонната помпа за намаляване на секрецията на стомашна киселина;
- Амоксицилин и / или кларитромицин, тетрациклини или метронидазол (антибиотични лекарства за унищожаване на бактериални клетки).
Haemophilus influenzae
H. influenzae е грам-отрицателна бактерия, отговорна за инфекции на дихателните пътища и нервната система, които могат да причинят остър отит, епиглотит, синузит, бронхит, пневмония или остър бактериален менингит.
Обикновено се използват антибиотици за лечение на инфекции от H. influenzae те са цефалоспорини, пеницилини или сулфонамиди.
Legionella pneumophila
Там L. pneumophila е Грам-отрицателна бактерия, отговорна за легионелозата, "инфекция, която засяга" дихателната система.
Легионелозата може да се лекува с лекарства като азитромицин, еритромицин, кларитромицин, телитромицин или флуорохинолони.